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在使用人外周血淋巴細(xì)胞分離液時有哪些注意事項(xiàng)呢

更新時間:2022-01-20瀏覽:1704次

  人外周血淋巴細(xì)胞分離液嚴(yán)格無菌、無毒、極低內(nèi)毒素、不影響細(xì)胞生物學(xué)功能,人外周血淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離,也適用于大多數(shù)哺乳動物單個核細(xì)胞的分離。
 
  下面讓我們一起來了解一下人外周血淋巴細(xì)胞分離液操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng):
 
  ⑴ 嚴(yán)格按照人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
 
  ⑵ 加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
 
  (3)封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
 
  (4)用洗板機(jī)洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
 
  (5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
 
  (6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
 
  (7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
 
  (8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
 
  (9)應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

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