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內(nèi)皮細胞3D培養(yǎng)模型的優(yōu)化探索

更新時間:2019-12-18瀏覽:3072次

----Lifeline授權(quán)代理新品熱銷系列內(nèi)皮細胞

 

內(nèi)皮細胞和細胞外基質(zhì)(ECM)

   內(nèi)皮細胞排列在循環(huán)系統(tǒng)的血管中,為血管的穩(wěn)定,傷口修復和炎癥反應提供重要支持。ECM是人體所有組織的關鍵部分,可提供結(jié)構(gòu)支持并介導細胞粘附和細胞間相互作用。內(nèi)皮細胞層下面是基底膜,基底膜是將內(nèi)皮細胞錨定在下面的組織結(jié)構(gòu)上的ECM薄片。內(nèi)皮細胞與基底膜和周圍ECM的相互作用驅(qū)動組織穩(wěn)態(tài),并有助于內(nèi)皮的整體功能,支持內(nèi)皮屏障功能并調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞的增殖和存活。

 

Lifeline®HUVEC在水凝膠生物工程中的應用

    在培養(yǎng)中研究細胞行為一直是一個挑戰(zhàn)。當細胞從組織的3D環(huán)境中移除時,它們將失去與ECM和基底膜的接觸;這會改變細胞的行為,而不反映出同一細胞在組織中的行為。因此,研究人員長期以來一直擔心在塑料培養(yǎng)皿上研究細胞不是復制體內(nèi)環(huán)境的*方法。因此,長期以來,人們一直非常關注優(yōu)化3D培養(yǎng)系統(tǒng)以更緊密地模擬細胞在體內(nèi)可能經(jīng)歷的過程。

    Su和他的同事在今年的一項研究中著手開發(fā)一種更好的3D培養(yǎng)基質(zhì),用于體外模擬基底膜,尤其是用于研究內(nèi)皮細胞。他們使用PEGX方法(聚乙二醇[PEG]交聯(lián))制成水凝膠基質(zhì),并與兩種肽結(jié)合:YIGSR(源自層粘連蛋白,一種基底膜蛋白)和QK(一種血管內(nèi)皮生長因子[VEGF]模擬物) 。他們假設將這兩種生物活性肽添加到水凝膠中將支持內(nèi)皮細胞的附著和信號傳導。

    作者首先使用條件永生化的腎小球內(nèi)皮細胞(GEnCs)確定了YIGSR和QK肽的*濃度,該細胞在含有100 mM QK和12 mM YIGSR的水凝膠上形成了大數(shù)量的繩狀結(jié)構(gòu)。水凝膠中游離胺含量的定量以及流變學表征(材料在力作用下如何變形的表征)證明水凝膠的交聯(lián)和生物活性肽的綴合是成功的。另外,掃描電鏡結(jié)果表明,在不同的水凝膠上幾乎沒有結(jié)構(gòu)變化。

   隨后,作者測試了水凝膠中QK肽的生物活性。他們在QK水凝膠上培養(yǎng)了Lifeline®人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC),并測量了VEGF受體VEGFR2的磷酸化,該蛋白在QK結(jié)合后會增加。如預期的那樣,作者觀察到在QK水凝膠上生長的HUVEC和GEnC中VEGFR2磷酸化增加。

   進一步的分析表明,在QK水凝膠上生長的HUVEC形成了索狀結(jié)構(gòu),并隨著時間的流逝而得以維持。這與在基質(zhì)膠(一種常用的3D培養(yǎng)基質(zhì))上進行培養(yǎng)形成對比,在基質(zhì)膠上形成了這些索狀結(jié)構(gòu),但zui終卻退了下來。作者還發(fā)現(xiàn),在QK / YIGSR水凝膠上培養(yǎng)5天后,參與細胞-細胞相互作用,細胞表面受體信號傳導和內(nèi)皮細胞功能的多個基因的基因表達上調(diào)。與HUVEC的行為相反,GEnC在QK,YIGSR和QK / YIGSR水凝膠上形成了較不牢固的簾線狀結(jié)構(gòu),此外,GEnC基因表達的大增加發(fā)生在基質(zhì)膠上,而不是在研究的水凝膠上。

    這項研究的結(jié)果表明使用PEGX方法開發(fā)并與生物活性肽綴合的水凝膠是c,盡管不同細胞類型對水凝膠上生長的反應可能不同。

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 LL-0003  血管內(nèi)皮細胞低血清培養(yǎng)套裝

 LL-0004  微血管內(nèi)皮低血清培養(yǎng)基套裝

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