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細胞培養(yǎng)常見問題解答(FAQ)

更新時間:2019-04-17瀏覽:2615次

細胞培養(yǎng)相關(guān)問題:

1 冷凍管應(yīng)如何解凍?

 

取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。

 

2 細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?

 

除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。

 

3 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?

 

不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活。

 

4 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?

 

不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

 

5 何謂FBS,FCS,CS,HS?

 

FBS(fetal bovine serum)和FCS (fetal calf serum)是相同的意思,兩者都是指胎牛血清,F(xiàn)CS 乃錯誤的使用字眼,請不要再使用。CS(calf serum)則是指小牛血清。HS(horseserum)則是指馬血清。

 

6 培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?

 

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH 的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2 濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10 % CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5 %CO2培養(yǎng)細胞。

 

7 何時須更換培養(yǎng)基?

 

視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。

 

8 培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?

 

除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。

 

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