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BioGems重組人胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白—細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)添加

更新時(shí)間:2017-12-18瀏覽:3190次

BioGems無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物—轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素

 

白蛋白、胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等是無(wú)血清培養(yǎng)體系中細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的因子。

Biogems的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同,批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細(xì)胞重組表達(dá),不含動(dòng)物成分。質(zhì)控嚴(yán)格,zui大程度地降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。

 

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選購(gòu)背景

一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)中的作用

二 重組和提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白的區(qū)別

三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度

 

一 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)中的作用

 

胰島素在無(wú)血清培養(yǎng)基中的作用

 

無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基中,胰島素為必加組分,這是由胰島素對(duì)細(xì)胞的重要作用決定的。

我們都知道,胰島素在體內(nèi)zui主要的功能是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖水平。其實(shí)胰島素的作用非常

廣泛,包括調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)和脂肪的代謝,以及促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)等。

 

轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的作用

 

轉(zhuǎn)鐵蛋白是通用的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)劑,其可通過(guò)幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)對(duì)鐵的攝取量而維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài),

進(jìn)而有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。

 

牛血清中含有牛種屬的轉(zhuǎn)鐵蛋白,由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的保守性,牛轉(zhuǎn)鐵蛋白可對(duì)人和動(dòng)物

細(xì)胞起到很好地保護(hù)和支持作用,因此培養(yǎng)基中通常要加入牛血清從而組成*培養(yǎng)基。無(wú)

血清培養(yǎng)基為達(dá)到與含血清培養(yǎng)基相同或相似的細(xì)胞培養(yǎng)性能,其中也必須添加轉(zhuǎn)鐵蛋白,

以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞鐵離子平衡的調(diào)節(jié),以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的維持。

 

二 無(wú)血清培養(yǎng)基中應(yīng)該添加提取的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白,還是重組的胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白?

 

人胰島素的來(lái)源有限,無(wú)法滿(mǎn)足臨床和科研的需求,因此人們通常從?;蜇i的胰臟中提取獲得胰島素。

人血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白的含量豐富,約為 25mg/ml,占血漿總蛋白的 4%,而且轉(zhuǎn)鐵蛋白的種屬間交叉活性比較強(qiáng),所以轉(zhuǎn)鐵蛋白多從人或牛的血漿中提取而得。

 

胰島素種屬間高度保守,豬和牛的胰島素與人的胰島素氨基酸序列上分別僅有 1 個(gè)和 3

個(gè)氨基酸的差異,所以豬和牛的胰島素*可以替代人的胰島素來(lái)進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床治療。然而,畢竟豬和牛的胰島素屬異種蛋白,進(jìn)入人體后容易產(chǎn)生抗體,影響治療效果,并引起副反應(yīng)。所以,目前臨床上廣泛應(yīng)用的是重組人胰島素,即使用基因工程手段,將人的胰島素基因轉(zhuǎn)移到細(xì)菌或者酵母細(xì)胞中,然后利用發(fā)酵工藝,進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn),從而得到大量、高純度的人胰島素。

 

同樣的,提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細(xì)胞治療的無(wú)血清培養(yǎng)基中時(shí),可能會(huì)將人或動(dòng)物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細(xì)胞而帶入人體,從而發(fā)生非預(yù)期的疾病。而重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白,則可*避免人或動(dòng)物病原體污染的可能性,因此更適合用于配制細(xì)胞治療用的無(wú)血清培養(yǎng)基。

 

三 胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度

 

胰島素

所培養(yǎng)的細(xì)胞不同,無(wú)血清培養(yǎng)基中所需的胰島素量也有所區(qū)別,一般在 1-10mg/L之間。

轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清培養(yǎng)基中的使用濃度

轉(zhuǎn)鐵蛋白

同樣的,細(xì)胞種類(lèi)不同,對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的需求量也不同,下表謹(jǐn)供參考。具體的濃度還是要根據(jù)細(xì)胞的種類(lèi)、狀態(tài)和想要實(shí)現(xiàn)的功能來(lái)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。

表 4:轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中的添加濃度

 

 

原代細(xì)胞  

CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)

雜交瘤和 Vero 細(xì)胞

轉(zhuǎn)鐵蛋白工作濃度  

5 -100mg/L

 10 - 50mg/L

5mg - 20mg/L

 

資料來(lái)源:BioGems

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